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實(shí)驗(yàn)8-抗腫瘤-

2023-04-10


甘草多糖免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)研究解讀(八)

甘草多糖抗腫瘤實(shí)驗(yàn)

于長水

 

在甘草多糖提純后,成為非特異免疫原性新物質(zhì)。在研發(fā)過程中,在投入市場應(yīng)用前,在動(dòng)物中實(shí)驗(yàn)觀察了甘草多糖抗腫瘤(癌)的作用,包括甘草多糖抑瘤作用、甘草多糖對荷瘤生存時(shí)間的影響。

甘草多糖抑瘤作用實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)由天津腫瘤醫(yī)院研究所流行病室進(jìn)行。

實(shí)驗(yàn)材料與方法:

實(shí)驗(yàn)選用昆明種純系小鼠,隨機(jī)分為四個(gè)組,每組十只。實(shí)驗(yàn)組三個(gè)組,分別為按50毫克、100毫克、200毫克不同劑量甘草多糖組,設(shè)一對照組。

腫瘤細(xì)胞取自已經(jīng)生長腹水瘤的小鼠,取腹水在顯微鏡下計(jì)瘤細(xì)胞數(shù),各組按瘤細(xì)胞0.1毫升注射在小鼠腹股溝皮下。在注射瘤細(xì)胞24小時(shí)后,開始按不同劑量注射甘草多糖液于腹腔,對照組注射腹腔同容量生理鹽水。

連續(xù)注射7天,最末一次后繼續(xù)飼養(yǎng)1周。然后解剖小鼠,取腫瘤組織稱重,并測量體積,還做病理檢查。

實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果與解讀:

一、腫瘤組織重量

對照組腫瘤重量平均為1.40克。

甘草多糖50毫克組腫瘤重量平均為0.66克。

甘草多糖100毫克組腫瘤重量平均為0.43克。

甘草多糖200毫克組腫瘤重量平均為0.61克。

從腫瘤平均重量看,甘草多糖各組平均為0.43克~0.66克,顯著低于對照組腫瘤平均重量的1.40克,比對照組重量減輕了約40%~60%。顯示了甘草多糖抑制腫瘤生長的作用。

二、腫瘤體積測量

對照組中腫瘤體積最大的為1.8×2×2(cm3

甘草多糖50毫克組中腫瘤體積組大的為1.3×0.6×0.5(cm3

甘草多糖100毫克組中腫瘤體積組大的為1.4×0.8×0.3(cm3

甘草多糖200毫克組中腫瘤體積組大的為1.3×0.7×0.5(cm3

從各組腫瘤中體積最大的看,甘草多糖各組腫瘤中體積最大的為0.34~0.46 cm3,顯著比對照組7.2 cm3體積縮小了90%以上。打個(gè)比方說,對照組中腫瘤體積最大的像個(gè)栗子,而甘草多糖各組中腫瘤體積最大的只有一個(gè)花生仁大小。顯示了甘草多糖抑制腫瘤生長的作用。

三、腫瘤病理檢查

對照組與甘草多糖各組小鼠淋巴結(jié)均未見轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞。

如此設(shè)想,上述抑瘤實(shí)驗(yàn)研究,是在給小鼠注射腫瘤細(xì)胞后24小時(shí)才給予甘草多糖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果;如果,先給予了甘草多糖后再注射腫瘤細(xì)胞,可能發(fā)揮更為顯著的抑瘤作用。

 

甘草多糖對荷瘤小鼠生存時(shí)間的影響

實(shí)驗(yàn)由天津市腫瘤研究所流行病室進(jìn)行。

實(shí)驗(yàn)材料與方法:

實(shí)驗(yàn)取小鼠50只,隨機(jī)分成5個(gè)組,同樣飼養(yǎng)。選用處于對數(shù)生長期的艾氏腹水瘤,計(jì)數(shù)制成注射液,每只小鼠腹腔注射0.1毫升。

甘草多糖分兩種給藥方法:

1~3組為后給藥組,在小鼠后腿腹股溝皮下注射、腹腔接種艾氏腹水瘤4小時(shí)后,1、2組開始每日分2~3個(gè)點(diǎn)皮下注射甘草多糖液1周,3組為對照組,注射等量生理鹽水。

4、5組為先給藥組,與后給藥組方法相同,4組為實(shí)驗(yàn)組給甘草多糖液1周,再腹腔接種艾氏腹水瘤液。5組為對照組注射生理鹽水1周,再腹腔接種艾氏腹水瘤液。

荷瘤(即帶瘤)小鼠生命延長時(shí)間,實(shí)驗(yàn)組從停止給藥后、對照組從停止給水第一天起計(jì)算。

結(jié)果與解讀:

一、

1~3組后給藥組四周內(nèi)小鼠存活天數(shù)

組別                小鼠只數(shù)            平均存活天數(shù)            生命延長率%

對照組(3組)         10                  12.8                    ——

 

1組實(shí)驗(yàn)組
(甘草多糖200毫克)   10                 21.1                     64.8

 

2組實(shí)驗(yàn)組
(甘草多糖100毫克)   10                 22.2                     73.4

 

 

 

4、5組先給藥組四周內(nèi)小鼠存活天數(shù)

組別              小鼠只數(shù)              平均存活天數(shù)          生命延長率%

對照組(5組)         10                17.8                    ——

 

4組實(shí)驗(yàn)組
(甘草多糖100毫克)  10                21.9                     23.0

 

二、在實(shí)驗(yàn)中觀察到,后給藥的對照組(生理鹽水組)小鼠在停止給藥的第7天開始出現(xiàn)死亡,半數(shù)以上在第10天前死亡,第16天時(shí)已有80%死亡,第27天時(shí)全部死亡。

后給藥的實(shí)驗(yàn)組小鼠在停藥后第12天開始出現(xiàn)死亡,至第20天約半數(shù)死亡,至第8周時(shí)甘草多糖高劑量組仍有半數(shù)小鼠存活,低劑量組也有40%存活。

先給藥的荷瘤小鼠存活時(shí)間,從接種艾氏腹水瘤后的第1天開始計(jì)算。對照組從接種瘤后第12天開始出現(xiàn)小鼠死亡,半數(shù)以上在3周內(nèi)死亡,24天時(shí)小鼠已全部死亡。

實(shí)驗(yàn)組小鼠從第14天開始出現(xiàn)死亡,第4周時(shí)有半數(shù)以上小鼠死亡,觀察至第8周時(shí)仍有20%存活。

三、甘草多糖抗腫瘤實(shí)驗(yàn)研究,展現(xiàn)諸多啟示:

1、甘草多糖具有抑制小鼠腫瘤重量與體積的顯著作用,證明抑制了腫瘤細(xì)胞的異常增殖;

2、甘草多糖對于荷瘤小鼠具有延長存活天數(shù)與生命延長率提高的作用,證明可使小鼠荷瘤生命延長率達(dá)64.8%~73.4%。

3、甘草多糖作為一種高效免疫調(diào)節(jié)劑,將有效聯(lián)合用于腫瘤防治。

4、先給藥組的小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果,含有提早防治腫瘤的意義。