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實(shí)驗(yàn)6-抗病毒感染-

2023-04-10

甘草多糖免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)研究解讀（六）

甘草多糖抗病毒感染實(shí)驗(yàn)

于長水

 

甘草多糖提純后，成為非特異免疫原性新物質(zhì)。在研發(fā)過程中，在投入市場應(yīng)用前，在動(dòng)物中實(shí)驗(yàn)觀察了甘草多糖抗病毒作用。

實(shí)驗(yàn)由天津醫(yī)科大學(xué)微生物教研室進(jìn)行。

實(shí)驗(yàn)材料與方法：

由于病毒只能在活的細(xì)胞內(nèi)生長，選用小鼠傳代纖維母細(xì)胞培養(yǎng)病毒。

病毒則以呼吸道病毒——腺病毒，腸道病毒——柯薩奇病毒做實(shí)驗(yàn)。

每種病毒分四個(gè)組，甘草多糖分為1:4、1:8、1:16、1:32四個(gè)稀釋度，稀釋度越高，含甘草多糖量越低。

  • 甘草多糖對細(xì)胞毒性測定

病毒在組織細(xì)胞生長對照

甘草多糖是否對細(xì)胞具有毒性，細(xì)胞是否適于病毒生長，都應(yīng)該先做預(yù)試驗(yàn)，以保證正式實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

在細(xì)胞液中加入不同稀釋度甘草多糖，培養(yǎng)48小時(shí)后觀察，結(jié)果細(xì)胞形態(tài)正常均無變化。

病毒在細(xì)胞液中生長良好，均出現(xiàn)細(xì)胞病變。

結(jié)果解讀：

表一、甘草多糖對細(xì)胞的毒性作用測定、病毒在細(xì)胞中生長對照

實(shí)驗(yàn)組             細(xì)胞對照             病毒對照

1:4                ——               ——                 ++++

1:8                ——               ——                 ++++

1:16               ——               ——                 ++++

1:32               ——               ——                 ++++

從表一可明顯看出，甘草多糖不同稀釋度溶液對細(xì)胞均無毒性。對照病毒生長良好，細(xì)胞適宜病毒生長。

據(jù)此，可進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。

  • 分組實(shí)驗(yàn)

1組：在細(xì)胞中，先加入不同稀釋度甘草多糖液，24小時(shí)后吸出甘草多糖液，加入病毒液。

2組：在細(xì)胞中，先加入病毒液，1小時(shí)后，洗去病毒液，加入不同稀釋度甘草多糖液。

3組：不同稀釋度甘草多糖液與病毒液同時(shí)加入細(xì)胞液中。

4組：不同稀釋度甘草多糖液與病毒液混合，放置37℃培養(yǎng)2小時(shí)后，再加入細(xì)胞液中。

相同的分組與相同的方法，分別對腺病毒、柯薩奇病毒做了實(shí)驗(yàn)觀察。

 

 

表二、甘草多糖對腺病毒感染保護(hù)率（%）

1:4      1:8     1:16      1:32    病毒對照     甘草多糖對照     細(xì)胞對照

1     67.5     64.9    70.3      74.5     ++++        ——             ——

2     14       5.3     6.0       10.0     ++++        ——             ——

3     60       49.4    48.9      42.5     ++++        ——             ——

4     45.3     43.5    49.6      47.4      ++++        ——             ——

 

 

表三、甘草多糖對柯薩奇病毒感染保護(hù)率（%）

1:4     1:8     1:16     1:32     病毒對照    甘草多糖對照    細(xì)胞對照

1     55.5    64.5    57.6     59.0      ++++        ——            ——

2     50.0    43.4    45.2     39.1      ++++        ——            ——

3     42.5    39.3    35.4     43.9      ++++        ——            ——

4     47.7    40.9    47.7     42.6      ++++        ——            ——

 

從表二、表三可看出，甘草多糖對腺病毒、柯薩奇病毒均有阻止病毒進(jìn)入細(xì)胞造成感染的功能作用。

還觀察到，甘草多糖對這兩種病毒均有直接的滅活作用（即殺滅病毒）。

呼吸道病毒和腸道病毒，都是經(jīng)常感染人的致病病毒，而且對于病毒目前還缺乏理想的高效治療藥物。

腺病毒是一群多型的病毒，主要經(jīng)上呼吸道侵入人體，也可經(jīng)眼結(jié)膜侵入，引起的疾病包括：急性上呼吸道感染、急性喉炎、咽結(jié)膜熱、流行性角膜結(jié)膜炎、非典型肺炎等癥。侵犯兒童和中老年人。

柯薩奇病毒是一群多型的病毒，主要通過腸道感染，可引起無菌性腦膜炎、流行性胸痛、夏季感冒、咽峽炎、心肌炎、麻痹癥等。這群病毒對外環(huán)境的抵抗力較強(qiáng)。