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實(shí)驗(yàn)2-對(duì)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化-1.5p-

2023-04-10


甘草多糖免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)研究解讀(二)

于長(zhǎng)水

甘草多糖對(duì)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)研究

 

在甘草多糖提純后,成為非特異免疫原性新物質(zhì),在研發(fā)過(guò)程中,在投入市場(chǎng)應(yīng)用前,在動(dòng)物中實(shí)驗(yàn)觀察了甘草多糖對(duì)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的免疫功能。

實(shí)驗(yàn)由北京大學(xué)臨床腫瘤學(xué)院臨床藥理研究室進(jìn)行。

實(shí)驗(yàn)材料與方法:

實(shí)驗(yàn)時(shí),取小鼠50只,隨機(jī)均分為五組,同樣飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)組三個(gè)組,每組分別給予1克、0.5克、0.25克甘草多糖水溶液灌胃;陽(yáng)性對(duì)照組為某制劑水溶液灌胃;空白對(duì)照組,只給予同等容量的水灌胃。各組均為每日一次灌胃,連續(xù)7天。

停止灌胃后次日,取小鼠脾臟,分離出淋巴細(xì)胞,進(jìn)一步觀察轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞。以對(duì)照組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率定為100%,觀察各實(shí)驗(yàn)組的轉(zhuǎn)化率結(jié)果(見(jiàn)下表)。

 

各組淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率

組別               劑量              小鼠只數(shù)              轉(zhuǎn)化百分率

空白對(duì)照組         ——              10                    100

某制劑             7.5克             10                    156

甘草多糖           1克              10                     114

甘草多糖           0.5克             10                     193

甘草多糖           0.25克            10                     316

實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果解讀:

     一、免疫系統(tǒng)的淋巴細(xì)胞是構(gòu)成免疫系統(tǒng)的主要細(xì)胞群體,在血液中占白細(xì)胞總數(shù)的20%~45%,一個(gè)成年人體內(nèi)約有1012個(gè)淋巴細(xì)胞。

淋巴細(xì)胞的顯著特征是,可轉(zhuǎn)化為許多功能不同的細(xì)胞群體,比如T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞(自然殺傷細(xì)胞)等等,T細(xì)胞和B細(xì)胞還可以進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為若干亞群,發(fā)揮各自的免疫功能。

這些轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞群及其亞群,在免疫功能應(yīng)答過(guò)程中,相互協(xié)作,相互制約,共同完成對(duì)抗原物質(zhì)(包括細(xì)菌、病毒等)的識(shí)別、反應(yīng)與清除,從而維護(hù)免疫功能的正常發(fā)揮,驅(qū)除病害。

二、從實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果看,甘草多糖對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著提高,尤其是0.5克和0.25克甘草多糖組高于對(duì)照組轉(zhuǎn)化率2~3倍,高于某制劑近1倍。

在小鼠脾臟的淋巴細(xì)胞中,既含有胸腺依賴性淋巴細(xì)胞(T細(xì)胞),也含有非胸腺依賴性淋巴細(xì)胞(B細(xì)胞)。T細(xì)胞主要擔(dān)負(fù)細(xì)胞免疫功能,B細(xì)胞主要負(fù)擔(dān)體液免疫功能,這就構(gòu)成了整體免疫功能的發(fā)揮。甘草多糖對(duì)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的顯著促進(jìn)作用,也就提高了整體免疫功能。

三、從各實(shí)驗(yàn)組研究結(jié)果看,以甘草多糖0.25克和0.5克組為促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的最適宜劑量。

 

 

 

甘草多糖對(duì)免疫低下動(dòng)物淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)

在取得甘草多糖對(duì)正常小鼠的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能具有顯著的促進(jìn)作用實(shí)驗(yàn)后,進(jìn)一步觀察了甘草多糖對(duì)免疫低下小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響。實(shí)驗(yàn)研究仍由北京大學(xué)臨床腫瘤學(xué)院臨床藥理研究室進(jìn)行。

實(shí)驗(yàn)材料與方法:

實(shí)驗(yàn)時(shí)取小鼠60只,隨機(jī)均分為六組,同樣飼養(yǎng)。除空白對(duì)照組外,其余五個(gè)組均皮下注射免疫抑制劑CTX,造成小鼠免疫低下?tīng)顟B(tài)。其中三個(gè)實(shí)驗(yàn)組,各組分別給予1克、0.5克、0.25克甘草多糖水溶液灌胃;陽(yáng)性對(duì)照組為某制劑水溶液灌胃;對(duì)照組給予同一容量的水灌胃。各組均為每日一次灌胃,連續(xù)7天。

停止灌胃后次日,取小鼠脾臟,分離出淋巴細(xì)胞,進(jìn)一步觀察轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞。以對(duì)照組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率定為100%,觀察各實(shí)驗(yàn)組的轉(zhuǎn)化率結(jié)果(見(jiàn)下表)。

 

對(duì)照組與免疫低下組淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率

組別               劑量             小鼠只數(shù)                轉(zhuǎn)化百分率

空白對(duì)照組         ——              10                     100.0

CTX組             CTX               10                     23.6

制劑             7.5克             10                     63.4

甘草多糖           1克              10                      83.2

甘草多糖           0.5克             10                     84.5

甘草多糖           0.25克            10                     120.6

實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果解讀:

一、CTX即環(huán)磷酰胺,是一種免疫抑制劑,按80毫克皮下注射,造成了小鼠顯著的免疫功能低下?tīng)顟B(tài),淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率從空白對(duì)照組的100%,降低到23.6%。成為免疫低下實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。

二、免疫低下各組小鼠,經(jīng)甘草多糖灌胃應(yīng)用后,免疫功能狀態(tài)都成倍提升,顯著提高了淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率。

三、從實(shí)驗(yàn)研究中,還特別觀察到,甘草多糖低劑量組有更顯著的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能,可使CTX致免疫低下小鼠的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率接近或超過(guò)對(duì)照組,恢復(fù)到正常免疫功能狀態(tài)。